Kvalitativ analyse for hepatitt C

Legg igjen en kommentar 9,080

En kvalitativ analyse av polymerasekjedereaksjonen - PCR for hepatitt C bestemmer tilstedeværelsen eller fraværet av HCV i kroppen. I laboratorieforhold studeres strukturen av RNA, som vil inkludere viruset. Ved detektering av viruset C, er det nødvendig å gjennomgå et behandlingsforløp, siden forsømmet tilstand av leveren vil føre til alvorlige konsekvenser. PCR av høy kvalitet utføres også etter utvinning for å bekrefte fraværet av antistoffer. Tilordnet for rutinemessig inspeksjon. Med lav konsentrasjon av kausjonsmiddelet i blodet, kan PCR (kvalitativ) ikke oppdage noe, fordi diagnostikksystemet har sine egne følsomhetsgrenser. I tilfelle av den første fasen av sykdommen eller mild form, utføres PCR ultradiagnostikk på ekstremt følsomt utstyr.

Hva er RNA-virus?

Begrepet RNA i hepatitt C-viruset (eller hepatitt C-virus-RNA) er selve leversykdommen. Virus C binder seg til den sunne cellen i kroppen ved å trenge inn i. Over tid, spredt over hele kroppen, er det bare nødvendig å komme inn i blodet. Som et resultat trengs patogenet i leveren, smelter med sine celler og virker hardt. Leverceller (hepatocytter) virker under påvirkning, undergår endringer, og fra dette dør de. Jo lengre viruset C er i leveren, jo større antall celler dør. Over tid utvikler farlige sykdommer som fører til ondartet degenerasjon og død.

Infeksjon av leveren med denne typen virus kan ikke manifestere seg eksternt. I mange år eller flere tiår føler en smittet seg helt sunn, og bare en tilfeldig undersøkelse avslører ofte patologi. Ved donering av blod til hepatitt undersøkes en del av RNA (ribonukleinsyre) kjeden, som er en del av det humane genet (DNA). Resultatene av laboratorietester bør ikke brukes til selvbehandling, fordi dette bare er en indikator. Det nøyaktige bildet og ytterligere diagnose er bedre bestemt av legen.

Når ferdig: indikasjoner på forskning

I bekreftelse på HCV utføres PCR-analyse (polymerasekjedereaksjon). Studier av PCR bidrar til å finne patogenmaterialet i strukturen av RNA og foreskrive en effektiv terapi. Utnevnt i følgende tilfeller:

  • påvisning av tegn på betennelse i leveren;
  • screening studier for forebygging;
  • undersøkelse av personer i kontakt
  • diagnose av hepatitt av blandet opprinnelse (bestemmelse av hovedpatogenet);
  • bestemme nivået på reproduksjonsaktivitet av viruset i kronisk form;
  • levercirrhose;
  • for å bestemme effektiviteten av den foreskrevne behandlingen.
Studier av PCR foreskrives av en lege for å bestemme effektiviteten av et behandlingsforløp for hepatitt.

Det er en kvalitativ og kvantitativ analyse av PCR. Kvantitativ PCR viser prosentandelen av RNA til virusbærere i blodet, og kvalitativ indikerer viral tilstedeværelse eller fravær. En positiv indikator for kvalitet (tilstedeværelse av hepatitt C RNA) trenger også kvantitativ forskning. Et høyt nivå av konsentrasjon av det forårsakende middelet av hepatitt C er forbundet med risikoen for overføring, det vil si infeksjon av andre. Lavt antall er bedre behandles. Mengden av RNA-virus i blodet er ikke relatert til intensiteten av sykdommen. PCR-analyse gjøres også ved interferonbehandling for å foreskrive varighet og kompleksitet i behandlingsforløpet.

Egenskaper av høy kvalitet PCR analyse for hepatitt C

En kvalitativ analyse med polymerasekjedereaksjonsindeksen er tildelt alle pasienter som har antistoffer mot hepatitt C i blodet. De som har vært syk og gjenopprettet, må ta testen igjen. Det anbefales å få testet for hepatitt B, og deretter, i tilfelle av en positiv konklusjon, og hepatitt D. også kvalitativt analysert ved reakatsiya bør utføres i forbindelse med andre blodprøver. Analyser vil vise et komplett bilde av viral spredning.

Fra testresultatene vil bare en positiv test for hepatitt C være synlig eller negativ, det vil si tilstedeværelse eller fravær av et virus. Hvis utgangen er "detektert", er viruset og fortsetter å være aktivt. Betegnelsen "ikke oppdaget" indikerer fraværet av et virus eller dets lille mengde. Med denne indikator bør ta hensyn til det faktum at den analytiske sensitiviteten av de diagnostiske systemer og forskjellig RNA hepatitt C kan fremdeles være i blodet, men vises ikke i analysen.

Spesielt sensitiv PCR-metode viser ultra hepatitt C selv i små mengder. En fluorescens hybridiseringsstudie brukes, som er mange ganger høyere enn standard PCR-systemer. Metoden brukes i flere tilfeller:

  • mistenkte skjulte former for hepatitt C;
  • PCR-diagnostikk bekreftet ikke patogenet, men det er antistoffer;
  • i tilfelle gjenoppretting
  • å oppdage tidlig infeksjon.
Tilbake til innholdsfortegnelsen

Dekoding analyse

PCR-dekodingen av HCV påvirker den endelige avgjørelsen når man foretar en diagnose, spesielt med ultrametod-metoden. Den største ulempen ved denne studien er streng overholdelse av sterile forhold for prøven og materialene. En liten avvik viser noen ganger unøyaktige analytiske konklusjoner, kompliserer diagnose og etterfølgende behandling. Analyse av PCR for bestemmelse av hepatitt-RNA viser ikke alltid selvtillit et bilde av sykdommen, noen ganger er unøyaktigheter tillatt, og i begge retninger.

Diagnostisering av hepatittvirus, det anbefales å bruke en omfattende undersøkelse.

Norm for indikatorer

Fraværet av JgM antistoffer mot viral hepatitt C i resultatene av studien regnes som normen i analysen av polymerasekjedereaksjonen. Samtidig viser funnene fra den serologiske analysen tilstedeværelsen av antistoffer mot C-viruset, og dette er også innenfor det normale området. En kvalitativ definisjon viser ikke intensiteten av sykdommen, det avslører bare årsaksmedlet til hepatitt C i RNA. Denne analysen gjentas etter behandling for å bekrefte den faktiske utvinningen.

avvik

Hvis JgM antistoffer mot HCV RNA er tilstede, indikerer dette en utviklingsinfeksjon. Sykdommen pågår samtidig akutt eller kronisk, manifestert i forskjellige stadier. Hvis en nedgang i antall antistoffer registreres, vil analysen indikere at resultatene av behandlingen ble oppnådd under utvinning. Det er bare svært sjeldne tilfeller av falske positiver som finnes i diagnosen. De finnes hos kvinner under graviditet og hos personer med andre smittsomme sykdommer.

Kostnaden for blodprøving og PCR for hepatitt C

Hepatitt C er en inflammatorisk patologi der leverceller påvirkes. Sykdommen utvikler seg som følge av penetrering av hepatitt C-viruset (HVC) i menneskekroppen.

Formen av sykdommen kan være akutt eller kronisk.

Ofte er symptomene på den akutte patologien hos de fleste pasienter fraværende, noen ganger er sykdommen ledsaget av smertefulle opplevelser i magen, redusert ytelse, økt tretthet, tap av appetitt, en mørk skygge av urin, misfarging av avføring, yellowness av huden og slimhinner, ledsmerter. Slike symptomer oppstår vanligvis 6-8 uker etter infeksjon, men kan oppstå etter seks måneder.

Ved utvikling av slike fenomener er det nødvendig å kontakte en medisinsk institusjon og gjennomgå en omfattende undersøkelse av hele organismen. Som en del av en medisinsk undersøkelse utføres en blodprøve for hepatitt C.

I dag, ved hjelp av moderne diagnostiske teknikker, kan denne patologien identifiseres i begynnelsen av utviklingen, noe som øker sjansene for en fullstendig kur av sykdommen.

Følgende grupper av mennesker er pålagt å teste for hepatitt C:

  • kvinner i perioden med å bære et barn;
  • personer med tegn på hepatitt;
  • medisinsk personale;
  • potensielt organ og blodgivere;
  • narkomaner, HIV-smittede personer, promiskuøse intime liv.

Liste over nødvendige studier

Hvilke tester skal jeg ta for hepatitt C? For å nøyaktig diagnostisere sykdommen, identifisere årsakene og bestemme tilstanden til leveren parenchyma, er følgende studier påkrevd:

  • generell urin og blodprøver;
  • biokjemisk analyse av blod;
  • PCR analyse;
  • blodprøve for påvisning av antistoffer mot HVC;
  • en blodprøve for eksisterende antistoffer mot sine egne leverceller;
  • leverbiopsi.

Dekoding av blodprøver for hepatitt C utføres av en spesialist. Vurder hver metode for forskning mer detaljert, så vel som vi vil forstå hvilken analyse av hepatitt C som er mest nøyaktig.

Generell analyse

Når du utfører en generell blodprøve for hepatitt C, kan du vurdere pasientens tilstand. Endringer i blodparametere blir ikke oppfattet som spesifikke symptomer på hepatitt, men med denne sykdommen er det slike forstyrrelser som:

  • redusert konsentrasjon av hemoglobin, blodplater og leukocytter;
  • øker innholdet av lymfocytter;
  • blodpropp er brutt
  • erytrocytt sedimenteringshastighet (ESR) øker.

Generell analyse av urin gjør det mulig å oppdage urobelin i dets sammensetning - et gallepigment som oppstår i urinen som følge av nedsatt leverfunksjon.

Biokjemisk analyse

Biokjemisk analyse av blod i hepatitt C gjør det mulig å identifisere slike lidelser som:

  • forhøyede nivåer av leverenzymer (alanintransaminase - ALT og aspartataminotransferase - AST), som kommer inn i blodet når hepatocytter er skadet. I en normal tilstand bør disse indikatorene for menn ikke være over 37 IE / l, for kvinner - ikke høyere enn 31 IE / l. En økt konsentrasjon av ALT og AST i asymptomatisk hepatitt C er ofte det eneste symptomet på denne sykdommen. I tillegg øker blodglutamyltranspeptidase alkalisk fosfatase (normalt ikke høyere enn 150 IE / l).
  • Bilirubininnholdet (både generelt og direkte) i blodet overskrides. Hvis nivået av gul pigment i serum overskrider 27-34 μmol / l, oppstår gulsott (opptil 80 μmol / l i mild form, 86-169 μmol / l - i moderat, over 170 μmol / l - i alvorlig form).
  • Nivået på albumin er senket, konsentrasjonen av gamma globuliner, tvert imot, økes. Gamma globuliner består av immunglobuliner - antistoffer som beskytter kroppen mot sykdomsfremkallende stoffer.
  • økt konsentrasjon av triglyserider i blodet.

PCR-test

Ved hjelp av PCR-teknikken er det mulig å diagnostisere sykdomsfremkallende middel. Utførelse av denne analysen gjør det mulig å oppdage et virus i blodet, selv om mengden er minimal. PCR-analysen for hepatitt C gjør det mulig å bestemme den eksisterende infeksjonen i blodet allerede etter 5 dager fra infeksjonstidspunktet, det vil si lenge før antistoffer opptrer.

Hvis resultatet av en blodprøve for hepatitt C ved PCR er positiv, indikerer dette forekomsten av en aktiv infeksjon i kroppen. Ved hjelp av denne metoden kan du gjennomføre en kvalitativ og kvantitativ studie av HVC RNA.

I løpet av den kvalitative analysen av PCR for hepatitt C, er det mulig å oppdage et eksisterende virus i menneskekroppen.

Denne diagnostiske prosedyren utføres hvis anti-HVC detekteres i blodet.

Dekryptering av analysen for hepatitt C inneholder informasjon om at en infeksjon enten har blitt detektert eller ikke oppdaget i kroppen. Normalt finnes det ingen patologiske stoffer i blodet.

Hvis hepatitt C-testen er positiv, betyr det at patogenet kontinuerlig deler og infiserer leverceller.

Resultatene av denne analysen kan være upålitelige, det er mulig i følgende tilfeller:

  • forurenset biomaterial brukt
  • i nærvær av heparin i blodet;
  • i nærvær av kjemiske eller proteinstoffer (inhibitorer) i det studerte biomaterialet, som påvirker elementene i PCR.

Kvantitativ analyse av hepatitt C gir informasjon om mengden av virus som er inneholdt i blodet, det vil si, bestemmer virusbelastningen. Med dette konseptet menes volumet av HVC RNA tilstede i blodet (for eksempel i 1 ml). I tolkningen av den kvantitative analysen for hepatitt C, uttrykkes denne verdien i digital ekvivalent, målt i IE / ml.

Blod for PCR for hepatitt C er tatt før terapeutiske tiltak. Etter analysen utføres på 1, 4, 12 og 24 uker. Studien i uke 12 er veiledende og utføres for å vurdere effektiviteten av medisinske prosedyrer.

Hvis testen for hepatitt C under graviditeten er positiv og virusverdiene overskrides, øker risikoen for overføring av patogener fra den syke mor til barnet flere ganger. Også med forhøyede verdier av viral belastning er implementeringen av terapeutiske tiltak vanskelig.

I følge transkripsjonen av tester for hepatitt C, hvis virusbelastningsverdiene overskrider 800.000 IE / ml, så er det høyt. Hvis tallene er under 400 000 IE / ml, anses nivået av virusbelastning som lav.

Analyse av hepatitt C ved PCR regnes som den mest nøyaktige og har flere fordeler over andre forskningsalternativer, nemlig:

  • direkte diagnose av sykdomsfremkallende middel. Ved utførelse av tradisjonelle studier bestemmes det av tilstedeværelsen av proteinmarkører som er avfallsprodukter av patogener. Dette indikerer bare at infeksjonen er tilstede i blodet. Ved testing for hepatitt C ved PCR, er det mulig å bestemme typen patogen av farlig patologi.
  • spesifisitet av teknikken. Under denne prosedyren bestemmes et unikt DNA-område i biomaterialet som tilsvarer bare en type patogen. Dette minimerer sannsynligheten for falske resultater.
  • høy følsomhet. Når du utfører PCR-analyse, kan du oppdage minimumsmengden av virus. Dette er viktig hvis betingede patogene stoffer identifiseres som bare utgjør en trussel hvis nivået øker.
  • Ved bruk av denne teknikken i en prøve av biomaterialet, kan flere patogener detekteres samtidig.
  • kan oppdage skjulte infeksjoner. I tillegg tillater analysen deg å diagnostisere patogene mikroorganismer som lever i celler og har høy antigenvariabilitet.

Hvis testresultatene er positive, blir spor av viruset funnet i biomaterialet, da nettverket har en infeksjon i kroppen.

En negativ PCR-analyse for hepatitt C betyr at det ikke er spor av infeksjon i biomaterialet.

Immunologisk studie

Denne metoden lar deg identifisere antistoffer mot alle typer hepatittvirus, samt antistoffer mot leverenes celler i din egen kropp, og utseendet bidrar til utviklingen av autoimmun hepatitt.

Resultatene som ble oppnådd i løpet av studien er relevante i 3 måneder, da skal du donere blod til hepatitt C.

Det er også mulig å utføre en ekspresstudie ved hjelp av spesielle teststrimler. Denne analysen gjør det mulig å bestemme antistoffer mot virus C i sammensetningen av blod og spytt. Denne prosedyren kan utføres uavhengig, hjemme.

Leverbiopsi

For å utføre en slik analyse blir et element av leveren parenchyma tatt og en histologisk undersøkelse av det oppnådde biomaterialet utføres. Dette lar deg vurdere tilstanden til kroppen: å identifisere inflammatorisk, nekrotisk foci, stadium av fibrose og så videre.

I dag brukes tester som erstatter histologisk analyse av hepatisk parenkyma.

For å vurdere stadiet av leverskade og intensiteten av betennelsesprosessen, brukes spesifikke venøse blodbiomarkører. Ved hjelp av FibroTest kan du vurdere graden av vekst av fibrøst vev.

Når du utfører Actitest kan du få informasjon om intensiteten av patologiske prosesser i leveren parenchyma. Bruke Steatototesta kan diagnostisere fettvev i leveren og vurdere omfanget av denne prosessen. Fibromax består av alle ovennevnte tester og kan inkludere noen andre studier.

Forberedelse for studien

Hvilke tester blir tatt for hepatitt C og hvordan vi har funnet ut denne typen forskning. Det er like viktig å vite hvordan å forberede seg på analysen.

For å oppnå pålitelige resultater, anbefales det å overholde følgende krav:

  • Hepatitt C-tester må tas om morgenen, på tom mage. Siste gang mat skal forbrukes minst 8 timer før studien.
  • Biomaterialet kan samles om dagen eller om kvelden. I dette tilfellet er det viktig at minst 5-6 timer passerer mellom det siste måltidet og analysen.
  • Før du donerer blod for hepatitt C, bør te, kaffe, juice eller andre drikker kasseres, bare vann er tillatt.
  • 48 timer før studien er det nødvendig å utelukke bruk av fettstoffer, stekt mat og alkoholholdige drikker.
  • i minst en time før analysen må du avstå fra å røyke.
  • Analyse bør ikke utføres umiddelbart etter ultralyd, instrumental, røntgenundersøkelse, massasje eller fysioterapi.
  • en dag før gjennomføringen av studien er det nødvendig å utelukke bruk av medisinering og intensiv fysisk aktivitet. Emosjonell stress er også kontraindisert.
  • Det anbefales å bruke 15 minutter før du utfører studien i en rolig tilstand.

Gjennomføring av blodoppsamlingsprosedyren

Hvor blir testet for hepatitt C? Prøvingen av biomaterialet for videre forskning utføres i laboratoriet til en medisinsk institusjon eller hos pasientens hjem.

Blod fra en blodåre tas som følger:

  • Ved hjelp av en spesiell tourniquet innpakket rundt pasientens underarm, blir den venøse blodstrømmen stoppet. Takket være slike manipulasjoner blir blodårene fylt med blod og vil bli mer synlige, noe som i stor grad vil lette prosessen med å sette inn nålen.
  • området av huden hvor nålen skal settes inn, behandles forsiktig med alkohol eller alkoholholdig væske.
  • En nål forsynes forsiktig inn i en blodåre, så er et testrør festet til det, spesielt utviklet for å samle blod.
  • Umiddelbart etter at nålen er satt inn i venen, blir klemmen fjernet fra pasientens arm.
  • Etter at blodvolumet som er nødvendig for analysen er blitt samlet, blir nålen forsiktig fjernet fra venen.
  • en steril bomullspinne eller gasbind med fuktighet må påføres injeksjonsstedet.
  • For å forhindre forekomst av et hematom, bør tampongen presses med litt innsats mot nålinnleggingsområdet, bøy armen ved albueforbindelsen og hold den i denne stillingen i flere minutter. Slike handlinger vil også bidra til å stoppe blodet raskere.

Forutsatt at teknikken for intern administrasjon er god, er denne prosedyren helt trygg og forårsaker ikke smertefulle opplevelser.

I sjeldne tilfeller kan blodårene svulme etter blodsamlingen. Dette fenomenet kalles "flebitt". En komprimering (ikke varm) vil bidra til å løse problemet, det bør brukes på hovne områder av huden flere ganger om dagen.

Visse problemer kan også oppstå hvis det er en blødningsforstyrrelse. Ta aspirin, warfarin og andre blodfortynnere kan føre til blødning. Det er derfor før du utfører analysen, er det nødvendig å nekte å ta medisiner. Hvis behandlingen ikke kan kanselleres, bør du informere spesialisten.

Datoer og priser

Hvor mye blir testet for hepatitt C? Resultatene av en blodprøve for hepatitt kan være klar om noen timer, og om noen dager (som regel ikke mer enn 8 dager). Varigheten av forberedelsen av resultatene avhenger av typen virus og den valgte analysemetoden. Hurtigere er studien utført med PCR-metoden. Resultatene i dette tilfellet vil være klare på bare noen få timer.

Hvor mye koster en hepatitt C-test? Avhengig av klinikken og kompleksiteten av studien, kan prisen på prosedyren variere fra 400 til 11 000 rubler.

Du bør være oppmerksom på at det kan ta flere uker å danne en tilstrekkelig mengde antistoffer mot HVC. Derfor, i et tidlig stadium i utviklingen av patologi, kan resultatet av en studie være falsk-negativ.

I tillegg er det mulig å oppnå upålitelige data ved analyse av dårlig kvalitet og brudd på transportbetingelsene for det oppnådde biomaterialet (prøver må leveres til laboratoriet i maksimalt 2 timer etter blodprøvetaking).

Hvis resultatet av studien er positivt, bør du straks kontakte en smittsom sykdom lege. Spesialisten vil foreta en ekstra undersøkelse og foreskrive riktig behandling.

Gjennomføre en PCR-analyse for hepatitt C og dekoding av resultatene

Hepatitt C PCR-analyse er en studie som har som hovedformål å identifisere kausjonsmiddelets genetiske materiale. Analysen avslører sykdomsfremkallende middel ved bruk av polymerasekjedereaksjonen. Denne diagnosen har en høy grad av nøyaktighet, spesifisitet for å oppdage fravær eller nærvær av en virusinfeksjon.

Essensen av diagnosen

For å utføre en PCR-analyse for bestemmelse av hepatitt C-viruset fra en pasient, tas venøs blod, som potensielt inneholder RNA (ribonukleinsyre) HCV av det ønskede viruset.

PCR-testen for hepatitt C innebærer prosedyren når følgende legges til pasientens blodpartikler:

  • primere (korte kunstig syntetiserte regioner av det nødvendige gen);
  • spesielt enzym (RNA polymerase).

Etter at samlingen av biologisk materiale er sendt for forskning i laboratoriet. En del av blodet trengs for direkte PCR-analyse, den andre sendes til studien ved hjelp av ELISA-metoden. Enzymet er i stand til på kort tid å øke antall genetiske materialer av patogenes virus. I et spesielt apparat utføres flere sykluser av varme- og kjøleprosesser. Ved sluttstadiet sammenlignes det oppnådde materialet med virusets gener og det konkluderes om tilstedeværelsen eller fraværet av patologi i pasientens kropp.

Essensen og gjennomføringen av PCR-analyse i laboratoriet. Filmet av SiberianMedicalLaboratory.

Typer av forskning

Det finnes 3 typer diagnostikk som gjør det mulig å bestemme tilstedeværelsen av hepatitt C-virus i menneskekroppen:

  • genotyping;
  • kvalitet;
  • kvantitativ.

Kvalitativ metode

Diagnose av hepatitt C med kvalitativ metode er anvendelig for pasienter i hvilke antistoffer mot viruset oppdages i blodprøven. I tilfelle tilstedeværelsen av den akutte fase av HCV RNA tillater slike diagnostiske tiltak å bestemme tilstedeværelsen av sykdommen innen 1-2 uker etter infeksjon. I løpet av denne perioden kan antistoffer mot hepatitt C ikke utvikles ennå.

Kvantitativ metode

En kvantitativ diagnostisk metode brukes til å bestemme konsentrasjonen av viruset i blodprøver. En slik test for viremia (grad av konsentrasjon) gjør det mulig å bestemme antall enheter av viralt RNA nøyaktig. Sluttresultatet uttrykkes i det tilsvarende volumet. Hvis vi snakker om kvantitativ analyse, måles indikatorene i 1 ml (1 cub. Cm).

Den virale lastparameteren betyr infeksjonsnivået til sykdommen, det vil si reflekterer graden av "infeksjonsevne" av pasienten. I praksis betyr dette at jo høyere konsentrasjonen av viruset i blodet er, desto større er sjansen for pasienten å infisere andre med hepatitt C. En kvantitativ metode for forskning gjør det også mulig å fastslå kvaliteten og effektiviteten av behandlingen som utføres.

genotyping

Genotyping avslører mutasjoner av sykdomsfremkallende middel. Før du forskriver en behandlingsplan, bestemmes genotypen av viruset: kvaliteten og varigheten av behandlingen avhenger av den. For eksempel, ved behandling av sykdom i type I er effektiviteten 60%, i tilfelle av II, III-type - ca. 80%.

Fordeler med PCR-analyse for hepatitt

Blant de viktigste fordelene ved prosedyren er:

  1. Muligheten for tidlig diagnose. PCR-analyse er i stand til å oppdage tilstedeværelsen av et virus i de tidlige stadiumene av infeksjon.
  2. Lavt feilresultat. Den studerte biologiske ressursen lar deg diagnostisere en del av genetisk materiale som er karakteristisk for bare en type virusinfeksjon. Denne situasjonen tillater å forhindre falske diagnostiske resultater.
  3. Høy grad av følsomhet. PCR-analyse er i stand til å oppdage RNA-virus i små mengder, noe som også gjør det mulig å spore latente infeksjoner i tide.

Indikasjoner for

Testing for PCR for hepatitt C er nødvendig, hvis tilgjengelig:

  • å ha kontakt med syke mennesker, noe som kan føre til infeksjon;
  • symptomer på levercirrhose (utvidelse av milten, ukarakteristiske endringer i leverens størrelse, påvisning av venøs pleksus på underlivet under huden);
  • positive resultater av ELISA;
  • økt aktivitet av AST og ALT (manifestert i biokjemisk analyse av blod);
  • Behovet for å kontrollere utførelsen av antiviral terapi;
  • Den første behandlingsfasen for behovet for å etablere en viral belastning;
  • gjennomføre det siste stadiet av terapi for å eliminere mulige tilbakefall;
  • Tilstedeværelsen av hepatitt B hos pasienten for å utelukke utviklingen av en blandet leverskade.

Hvordan forberede seg på bloddonasjon for PCR-studier

Forberedelse for PCR-analyse inkluderer følgende anbefalinger:

  • blod blir tatt om morgenen;
  • Analyse utføres på tom mage, så det er tilrådelig å ta en pause mellom det siste måltidet på 8-10 timer;
  • noen dager før diagnosen bør utelukkes fett, krydret og stekt mat, alkoholholdige drikker og røyking;
  • en dag før analysen bør man avstå fra tung fysisk anstrengelse, ekskludere klasser i treningsstudio eller svømmebasseng.

Analyseresultater: normer og avvik

Analysen i seg selv er ikke lang tid, og den høyt kvalifiserte spesialist-hepatologen eller smittsomme spesialisten dekrypterer resultatene av PCR for hepatitt C. Basert på resultatene av analysen, blir pasienten diagnostisert.

For å kunne tydeliggjøre resultatene av undersøkelsen, tas indikatorene i betraktning

  • biokjemisk analyse av blod;
  • ultralyddata;
  • biopsi resultater.

Tolkning av kvantitativ analyse

Når man oppnår resultatene av PCR-kvantitativ analyse, tas følgende indikatorer i betraktning:

Grunnleggende Hepatitt C-test

Viral hepatitt C er et alvorlig medisinsk og sosialt problem. Omtrent 180 millioner mennesker i verden lider av denne sykdommen, 350 tusen dør hvert år. Langt latent (asymptomatisk) forløb av hepatitt C fører til sen diagnostikk. Analyse av hepatitt C utføres for å diagnostisere sykdommen, differensial diagnose, med hjelp, bestemme den tidligere overførte sykdommen "stående". Studien brukes til pasienter med symptomer på hepatitt C, forhøyede nivåer av leverenzymer, ved å skaffe seg informasjon om tidligere overført hepatitt av uspesifisert etiologi, hos personer med risiko og screeningsstudier.

Diagnose av hepatitt C utføres i 2 trinn:

Fase 1 Bestemmelse av tilstedeværelse i serum av antistoffer mot hepatitt C-viruset (anti-HCV).

Fase 2 I nærvær av anti-HCV-test blir utført i nærvær av RNA (ribonukleinsyre) PCR for hepatitt C. Forsøket viser den fase av prosessen - den "aktiv / inaktiv", løse problemet med behov for behandling. Det er kjent at ca 30% av personer som er smittet med hepatitt C virus, bli kvitt infeksjonen på egen hånd, som de har et sterkt immunforsvar og ikke trenger behandling. Bruk av PCR bestemmes av genotypen av viruset. Ulike genotyper reagerer annerledes på behandling.

Graden av leverskade i hepatitt C bestemmes ved bruk av biopsi eller andre invasive og ikke-invasive tester (for eksempel fibrotest). Graden av leveren steatosis bestemmes av steatotesta. I alle tilfeller bør diagnosen hepatitt C være basert på data fra den epidemiologiske undersøkelsen, sykdommens klinikk og data om biokjemiske blodprøver.

Fig. 1. Sterke virkninger av viral hepatitt C-intens ascites.

Hepatitt C-test: anti-HCV

Anti-HCV antistoffer (anti-HCV) er spesifikke markører for infeksjon. I en sykes kropp produseres spesifikke antistoffer til proteinene i hepatitt C-viruset (antigenene) - immunoglobuliner av klassen IgM og IgG (anti-HCV IgM / IgG).

Når et positivt resultat oppnås for antistoffer mot hepatitt C-virus bekreftelsestest blir utført - bestemmelse av totalt antistoff mot strukturelle og ikke-strukturelle proteiner av viruset. De strukturelle proteiner av et omhyllet virus E1 og E2 er generert av anti HCV IgM, nukleokapsidproteinet C - cor (av anti HCV IgG), og 7-strukturelle proteiner enzymer NS - Anti HCV NS IgG.

For påvisning av antistoffer mot hepatitt C-viruset, anvendes enzym-koblet immunosorbentanalyse (ELISA). Bekreftende tester - RIBA (rekombinant immunoblotting), mindre ofte Inno-Lia (analyse av syntetiske peptider) brukes til å bekrefte (+) ELISA-resultater.

Anti HCV IgM

  • HCV IgM antistoffer opptrer i serum 4-6 uker etter infeksjon og når raskt maksimalt. Ved slutten av den akutte prosessen (etter 5-6 måneder), reduseres konsentrasjonen.
  • Langvarig registrering av tilstedeværelsen av anti-HCV IgM indikerer at hepatitt C har oppnådd et kronisk kurs.
  • Økningen i nivået av IgM i perioden med kronisk hepatitt C antyder reaktivering av den smittsomme prosessen.
  • Nivået på IgM immunoglobuliner lar deg vurdere effekten av behandlingen.

Anti HCV IgG

HCV IgG antistoffer vises i pasientens serum 11 til 12 uker etter infeksjon. På 5-6 måneder registreres toppkonsentrasjonen. Neste antistoffer

forbli på et konstant nivå gjennom sykdommens varighet i den akutte perioden og i gjenopprettingstiden.

Totalt antistoffer mot hepatitt C-virus

Totale antistoffer mot hepatitt C-viruset (anti HCV totalt) brukes til å diagnostisere "friske" tilfeller av sykdommen. Total antistoff - Dette antistoffet nukleokapsidproteinet C - cor (av anti HCV IgG) og 7 ikke-strukturelle proteiner og enzymer, NS (Anti HCV NS IgG) - av anti HCV NS3, NS4 og HCV anti av anti HCV NS5.

Den totale antistoff mot hepatitt C-virus vises i blodserum infiserbare etter 11 - 12 dager fra begynnelsen av infeksjonen og oppnår maksimal til 5 - 6 måneders og som er lagret på et konstant nivå for varigheten av sykdommen i den akutte fasen og i 5 - 9 år etter rekonvalesensperioden.

Hver av antistofftyper har en uavhengig diagnostisk verdi:

  • AntiHCVC (cor) er hovedindikatorene for kontakt med hepatitt C.
  • AntiHCVNS3 oppdaget en av de første i prosessen med serokonversjon (produksjon av antistoffer som respons på tilstedeværelsen av viruset), angi alvorlighetsgraden av den smittsomme prosessen og indikere en høy viral belastning. Med deres hjelp bestemmes arvelig hepatitt C hos pasienter som ikke mistenker at de har en infeksjon. Langvarig tilstedeværelse av anti-HCV NS3 i serum indikerer en høy risiko for kronikk i prosessen.
  • AntiHCVNS4 antyder at den smittsomme prosessen har et langt kurs. Nivået av antistoff titere kan vurderes på graden av leverskade.
  • AntiHCVNS5 indikerer tilstedeværelsen av viralt RNA. Deres oppdagelse i den akutte perioden er en forløper til kronikken i prosessen. Høye antistoff titere på bakgrunn av behandling tyder på at pasienten ikke reagerer på behandlingen.
  • AntiHCVNS4 og antiHCVNS5. Denne typen antistoffer opptrer i de siste stadier av utviklingen av hepatitt. Deres reduksjon indikerer dannelsen av remisjon av den smittsomme prosessen. Etter behandling reduseres titrene av anti-HCV NS4 og anti-HCV NS5 innen 8 til 10 år. Denne typen antistoff beskytter ikke mot reinfeksjon.

Fig. 2. Macrodrug av leveren. Levercirrhose i hepatitt C.

Dekoderingsanalyse for hepatitt C

Fraværet av antistoffer mot hepatitt C-viruset er indikert med begrepet "Norm". Dette betyr imidlertid ikke alltid at sykdommen ikke er til stede hos mennesker. Så blir fraværet av antistoffer i blodet av en smittet person registrert til de ser ut i blodet - opp til 6 måneder fra infeksjonstidspunktet (i gjennomsnitt 12 uker). Fraværet av antistoffer i blodet av en infisert person kalles et "serologisk vindu". 3. generasjons testsystemer (ELISA-3) har høy spesifisitet (opptil 99,7%). Omtrent 0,3% utgjorde falske positive resultater.

Tilstedeværelsen av anti-HCV indikerer en aktuell infeksjon eller tidligere infeksjon.

  • Deteksjon av IgM antistoffer og anti HCV Cor Cor IgG, økning i titere av anti HCV Corue IgG og (+) PCR resultater i nærvær av kliniske og laboratorie tegn på akutt hepatitt indikerer en akutt periode av sykdommen.
  • Deteksjon av anti-IgM, anti-HCV Corue IgG, anti-HCV NS IgG og (+) PCR resultat i nærvær av kliniske og laboratorie tegn på hepatitt indikerer reaktivering av kronisk hepatitt C.
  • Deteksjon av anti-HCV Coré IgG og anti-HCV NS IgG i fravær av kliniske og laboratorie tegn på hepatitt og et negativt PCR resultat indikerer at pasienten har kronisk hepatitt i latent fase.

Fig. 3. Macrodrug av leveren. Primær leverkreft. En av årsakene til utviklingen av onkologi er levercirrhose, utviklet på bakgrunn av kronisk hepatitt C.

PCR-analyse for hepatitt C

Polymerasekjedereaksjonen (PCR) er "gullstandarden" for diagnose av viral hepatitt C. Testets høye følsomhet gjør det mulig å oppdage det genetiske materialet til virus (RNA), selv om det bare er noen få av dem i det aktuelle materialet. PCR er i stand til å detektere RNA-virus lenge før utseendet av antistoffer i serum, men ikke tidligere enn den femte dagen fra infeksjonstidspunktet. Når en sykdom oppdages av PCR, oppdages RNA-virus ikke bare i serum, men også i leverbiopater.

  • Polymerasekjedereaksjonen gjør det mulig å bestemme tilstedeværelsen eller fraværet av hepatitt C-virus i blodet og bestemme på begynnelsen av behandlingen. Det er kjent at opptil 30% av pasientene blir kvitt infeksjonen selv, da de har et sterkt immunforsvar og ikke trenger behandling.
  • Hepatitt C PCR brukes til å overvåke effektiviteten av behandlingen.
  • PCR brukes i fravær av antistoffer i blodet, men i nærvær av sterke mistanke om hepatitt C (økte nivåer av alkalisk fosfatase, totalt bilirubin, 2 ganger overskudd av leverenzymer AST og ALT).
  • PCR-analyse for hepatitt C brukes til å kontrollere intrauterin overføring av hepatittvirus.

Hepatitt C virusvekt

Ved hjelp av PCR-analysen er det mulig å bestemme ikke bare forekomsten av virus RNA i blodet - en kvalitativ analyse (detektert / ikke oppdaget), men deres nummer - virusbelastningen (antall enheter av viralt RNA i 1 ml blod). Kvantitativ indikator PCR brukes til å overvåke effekten av behandling av hepatitt C.

Metodene som brukes for PCR har forskjellig følsomhet. I Russland, i samsvar med metodologiske anbefalinger fra 2014, anbefales det å anvende metoder som har en følsomhet på 25 IE / ml eller mindre. I henhold til anbefalingene fra European Association for Liver Study of 2015, foreslås det å anvende metoder for å bestemme viralt RNA med følsomhet på 15 IE / ml eller mindre.

Avhengig av testsystemets følsomhet mottar pasienten ett eller annet resultat av studien:

  • Den minste følsomheten til COBAS AMPLICOR analysatoren er 600 IE / ml (analysatoren av den gamle generasjonen).
  • Den minste følsomheten til HCB-TEST COBAS AMPLICOR analysatoren er 50 IE / ml, som er 100 eksemplarer per ml.
  • Minimum sensitiviteten til HCV RealBest RNA analysatoren er 15 IE / ml, som er 38 eksemplarer per ml (inkludert i gruppen av moderne testsystemer). Specificiteten av disse analysatorene er 100%. Med deres hjelp detekteres RNAer av hepatitt C-virus av subtypene 1a og 1b, 2a, 2b, 2c og 2i, 3, 4, 5a og 6.

Hvis det er kopier av RNA under følsomhetsgrensen til denne analysatoren, mottar pasienten svaret "ikke oppdaget".

Fig. 4. Et eksempel på PCR analyse (kvantitativ test). Den virale belastningen er bestemt for hepatitt C.

Tolkning av resultatene av PCR analyse for hepatitt C

  • Fraværet av RNA-virus indikerer fravær av infeksjon.
  • Fraværet av RNA mot tilstedeværelse av antistoffer i blodet indikerer at hepatitt C-viruset forsvinner under påvirkning av behandling eller med selvhelbredelse.
  • I noen tilfeller er viruset tilstede i blodet, men på subliminale nivåer, når konsentrasjonen ikke er fanget av analysatorer. Slike pasienter forblir farlige med hensyn til infeksjon.
  • Deteksjon av RNA-viruset i 6 påfølgende måneder hos pasienter med akutt hepatitt C antyder at sykdommen har tatt et kronisk kurs.
  • Reduksjon av viral RNA under behandling indikerer effektiviteten av behandlingen og vice versa.

Fig. 5. Fet hepatose. En av årsakene til leverskade er viral hepatitt C.

Grunnleggende biokjemiske blodprøver for hepatitt C

Biokjemiske blodprøver bidrar til å etablere den funksjonelle tilstanden til mange menneskelige organer og systemer.

Hepatiske enzymer ALT og AST

Hepatiske enzymer syntetiseres intracellulært. De er involvert i syntese av aminosyrer. Et stort antall av dem finnes i cellene i leveren, hjertet, nyrene og skjelettmuskulaturen. Med organets nederlag (brudd på integriteten til cellemembranen) kommer enzymer inn i blodet, hvor nivået stiger. Forhøyede nivåer av enzymer er registrert med nederlaget (lysis, destruksjon) av leverceller, hjerteinfarkt og andre sykdommer. Jo høyere nivået av transaminaser i serum, desto flere celler ble ødelagt. ALT dominerer i leverceller, AST - i myokardceller. Ved ødeleggelse av leverceller øker nivået av ALT 1,5 - 2 ganger. Ved ødeleggelse av myokardceller øker nivået av AST med 8 - 10 ganger.

Ved diagnostisering av kronisk viral hepatitt er det nødvendig å være oppmerksom på AST / ALT-forholdet (de Ritis-koeffisienten). Et overskudd av AST over ALT indikerer levercellebeskadigelse.

  • AST-normen for menn er opptil 41 enheter / l, kvinner - opp til 35 enheter / l, barn over 12 år - opp til 45 enheter / l.
  • Normen for ALT for menn er opptil 45 enheter / l, kvinner - opptil 34 enheter / l, barn 12 år og eldre - opptil 39 enheter / l.
  • Normalt (hos friske mennesker) varierer AST / ALT-forholdet fra 0,91 - 1,75.

bilirubin

Bilirubin er et sammenbruddsprodukt av hemoglobin. Bilirubin i blodet finnes i form av indirekte (opptil 96%) og direkte (4%). Prosessen med dekomponering av dette stoffet skjer hovedsakelig i leverenes celler, hvor den utskilles fra kroppen med galle. Ved ødeleggelse av leverceller øker nivået av bilirubin i serum. Normalt er det totale bilirubininnholdet mindre enn 3,4 - 21,0 μmol / L. På et nivå på 30-35 μmol / l og høyere trenger bilirubin inn i vevet, på grunn av at huden og sclera blir gulsot.

Fig. 6. Når hepatitt C i blodet øker nivået av bilirubin. Stoffet trenger inn i vevet, og derfor blir huden og sclera gulsot.

PCR diagnostikk for hepatitt C

Hepatitt C er en betennelse i leverceller som oppstår som følge av infeksjon med HCV-viruset (hepatitt C) ved kontakt med blodet av en infisert person. Den genetiske koden til flavivirus HCV bæres av et RNA (ribonukleinsyre) molekyl inneholdt i virusets struktur. Dette livstruende fenomenet skiller seg ut av hemmelighold i begynnelsen av patologien. Tidsintervallet mellom infeksjon og symptompåvirkning (immunsystemets respons) kan være fra en måned til seks måneder. Som regel tar sykdommen en kronisk form og er vanskelig å kurere.

Moderne medisiner lar deg diagnostisere patologi med mindre leverskade. De vanligste og effektive diagnostiske metodene inkluderer PCR-analyse. Vurder i denne artikkelen hva det er og hva slags det eksisterer.

Hva er studien

PCR-analyse for hepatitt C er en laboratorieundersøkelse som oppdager flavirus, det genetiske materialet av ribonukleensyre (RNA). Det bestemmer antall RNA molekyler i blodet, kvaliteten på det biologiske materialet, den genetiske typen HCV flavirus.

PCR-metoden for hepatitt C gjør det mulig å oppdage minimal mengde flavirus før dannelsen av antistoffer, som regel, snart etter infeksjon.

Studien refereres ofte til som RNA-analyse, da den detekterer ribonukleinsyrepartikler som har en størrelse på 30-60 nm inneholdt i en flavavirus.

Studien utføres som følger: På en tom mage, gir pasienten blod fra en blodåre, som deretter testes med ulike metoder:

  • Real-Time PCR utføres på en lukket automatisert måte og har en lavere grense for å oppdage RNA-virus på 15 IE / ml;
  • COBAS AMPLICOR med følsomhet på 50-100 IE / ml.

Jo høyere terskelen for følsomheten til den diagnostiske teknikken er desto større er sjansene for å oppdage det laveste virusinnholdet i det biologiske materialet som studeres.

Hvilke typer analyser brukes

En analyse som har blitt brukt i flere tiår, kalles PCR-hepatitt, og det kan oppdages ganske enkelt og raskt. I medisin er det to metoder for reaksjon, fundamentalt forskjellig fra hverandre:

  • kvalitativ metode avslører tilstedeværelsen i det biologiske materialet av den genetiske kilden til et bestemt virus;
  • kvantitativ analyse måler antall genetiske forhold, som gjør det mulig å bestemme scenen i patologien eller å evaluere effektiviteten av det terapeutiske kurset;
  • genotyping bestemmer hvilken type virus som finnes i kroppen.

Generelt bidrar en blodprøve til å identifisere typen av viremia og patogenens genetiske type. Studien utføres som regel 1 gang avhengig av graden av følsomhet i diagnosesystemet. Om nødvendig utføres retesting ved bruk av et ultrasensivt reagens.

PCR av høy kvalitet

Hva er høykvalitets PCR RNA for hepatitt C? Essensen av reaksjonen ligger i nærvær av hepatitt-RNA-sekvensen, og reaksjonen er mulig bare i nærvær av virale proteiner med en lignende etymologi i ELISA. I forbindelse med sammenligning oppdages belastningen og mulig skade på leverområdet.

Et karakteristisk trekk ved denne metoden er evnen til å oppdage selv tilstedeværelsen av et eget gen.

Det skal bemerkes at pasienten etter å ha mottatt resultatene av en PCR- og ELISA-test, trenger passende behandling, uavhengig av hva resultatet av det endelige immunomålesningen var. Positivt indikerer infeksjon, og PCR-negativ indikerer et redusert antall viruspartikler i forhold til følsomhetsnivået.

Det er flere forhold som påvirker produksjonen av en negativ PCR og ELISA:

  • Mangelen på passende forhold for innsamling av materiale;
  • den resulterende analysen inneholder forurensning;
  • i tilfelle en tidlig injeksjon av heparin til pasienten.

På den delen av pasienten er det ikke nødvendig å observere visse regler for blodprøvetaking for PCR-analyse, i dette tilfellet er kvaliteten på denne analysen avhengig av den medisinske profesjonelle som utfører prosedyren. Evnen til å fastslå forekomsten av sykdommen (spesielt i akutt form) vises innen få uker etter infeksjon.

Kvantitativ analyse

En kvantitativ test anbefales for å oppdage viral belastning umiddelbart før dannelsen av ytterligere terapi og reaksjonen av kroppen. Prosessen med blodprøvetaking utføres på lignende måte som med høy kvalitet PCR og ELISA, er den eneste tilstanden fraværet av muligheten for å røyke pasienten før prosedyren.

Når det gjelder egenskapene til dataene som er oppnådd som et resultat av studien, er den økte belastningen preget av indikatorer fra 800000 IE / ml, lav - 400000 IE / ml. Tilstedeværelsen av et virus i pasientens kropp er indisert ved PCR for hepatitt er ikke en negativ kvalitativ test.

Denne typen forskning gjør det mulig å bestemme hvor farlig pasienten er for menneskene rundt seg. For eksempel indikerer identifiseringen av et høyt nivå en økt infektivitet hos pasienten. I tillegg hjelper resultatene av analysen til å formulere den mer effektive behandlingen og bestemme hvor mye eksisterende terapi anses å være effektiv.

Den raske negative responsen av testene indikerer suksessen til den valgte teknikken, og den langsomme indikerer behovet for justeringer og bruken av forskjellig behandling.

Prosessen med å ta analyseprosedyren avhenger av den spesifikke dagen av sykdommen. Den første bestemmelsen utføres den første dagen etter at pasienten er innlagt på sykehuset, og prosedyren gjentas ved 4, 12 og 24 uker etter å ha tatt medisinene.

En kvantitativ analyse viser således hvilken behandling som er den mest effektive, varigheten av tilgjengelig terapi og pasientens fare i forhold til andre mennesker.

genotyping

I studiet av materialanalyse er det viktig å bestemme nøyaktigheten av genotypen av viruset, som finner sted. For tiden er det 11 varianter av hepatitt C-viruset, som igjen inkluderer visse underarter.

Alle disse artene reagerer annerledes på forskjellige behandlinger, og enkelte arter er absolutt resistente mot mange stoffer.

Genotypen gjør det mulig å bestemme og vise levertilstanden. Det er ikke uvanlig at resultatene registreres "ikke skrevet", noe som betyr at viruset i pasientens blod ikke oppdages av dette testsystemet. Dette kan oppdages hvis en bestemt genotype ikke samsvarer med denne sonen. I en slik situasjon blir analysen gjentatte ganger, og et mer sensitivt system brukes til å studere materialet.

Ultra følsom metode

Den ultrasensitive metoden er nødvendig i visse tilfeller når diagnosen hepatitt ikke kan utføres med andre metoder, og når man skal ta en analyse, bestemmes den behandlende legen:

  • i tilfelle mistanke om tilstedeværelse av hepatitt C-virus hos pasienter med latent type sykdom;
  • Tilstedeværelsen av antistoffer mot hepatitt C-viruset, ikke bekreftet ved PCR-diagnostikk;
  • for å bestemme kvaliteten på effektiviteten av den valgte behandlingsmetoden og bekrefte eliminering av sykdommen.

Sensitiviteten til denne metoden er mye høyere enn de som vanligvis brukes, men denne metoden utelukker ikke å oppnå falske resultater, både positive og negative. I en slik situasjon er det viktig å kontrollere kvaliteten på prosedyren og muligheten for forurensning av selve materialet.

Forklaring av PCR-analyse

Avkodingen av analysen utføres på grunnlag av de presenterte materialer, mens resultatene av laboratorieundersøkelser inkluderer visse data beskrevet ovenfor.

Dekoding kan inkludere en positiv PCR-polymerasekjedereaksjon og en negativ ELISA i analysen, hvilket betyr at pasienten ikke har tegn på hepatitt C i blodet, men tidligere har han overført den akutte form av sykdommen. Som regel, når de diagnostiserer, bruker spesialister bruk av PCR testindikatorer.

Sammenfattende alt ovenfor kan det konkluderes at under analysen er det viktig å følge alle reglene og anbefalingene slik at de oppnådde resultatene er så nøyaktige som mulig, og på grunnlag av dataene som er oppnådd, er det mulig å bestemme effekten av den brukte terapien og den videre sjansen for fullstendig gjenoppretting.

PCR-analyse for hepatitt C

For diagnosen "kronisk viral hepatitt C (CVHS)" kreves en omfattende undersøkelse av personen, som inkluderer kliniske, laboratorie- og instrumentstudier. Viktig fra diagnosenes synspunkt for riktig diagnose er PCR-metoden - polymerasekjedereaksjon.

Hva viser denne analysen og hvorfor er det nødvendig?

Denne laboratoriemetoden registrerer hepatitt C-virus-RNA i humant blod. Sammen med den koblede immunosorbent assay (ELISA) for antistoffer mot viruset, blir PCR brukt for organisering og diagnose av HCV-genotype sin opphavsmann. Denne undersøkelsen er en av de nyeste metodene for laboratoriediagnostikk. Dens pålitelighet ved CVHS overstiger 97%, noe som anses som en veldig god indikator for forskning.

Det er tre blod-PCR-analyser for CVHC: kvalitativ, kvantitativ og virusgenotyping. Den første studien (kvalitativ analyse) av et virus oppdager det i blodet, og brukes derfor kun til diagnose.

Den andre (kvantitative) studien bestemmer graden av viral belastning på kroppen, derfor brukes til å overvåke effektiviteten av behandlingen.

Den tredje PCR (genotyping) klargjør diagnosen, og etablerer genotypen av viruset, noe som er svært viktig for utnevnelsen av riktig antiviral behandling.

Essensen av polymerasekjedereaksjonsteknikken er bruk av enzymer som multipliserer det genetiske materialet til patogenet i biomaterialet. Under prosessen med slik replikasjon oppvarmes røret med blod flere ganger og avkjøles til temperaturen som kreves for å akselerere den enzymatiske reaksjonen. Som et resultat av disse manipulasjonene øker mengden av virusgenomet mange ganger, slik at det kan detekteres selv med en minimal mengde.

PCR-diagnostikk har mange fordeler i forhold til andre laboratorietester:

  • høy følsomhet - 97-98%;
  • garantert analytisk spesifisitet (avslører nøyaktig det patogenet du vil finne, og ikke dets relaterte belastning);
  • Hastighetshastighet (det tar ikke mer enn 2 dager å få en konklusjon).

Tre typer PCR-analyser

Høykvalitets PCR-analyse er tildelt alle pasienter der ELISA-analyse oppdaget antistoffer mot HVGS-viruset. Etter å ha utført PCR av høy kvalitet, kan to responsalternativer oppnås: "RNA er detektert" eller "RNA blir ikke oppdaget." For å oppdage minimal mengde virus i blodet, er det nødvendig med testsystemer med følsomhet på minst 50 IE / ml. Hvis konsentrasjonen av viruset i pasientens blod er mindre enn det diagnostiske stoffet kan bestemme, kan resultatet av studien være falskt negativt. For å unngå en slik diagnostisk feil, bør laboratorier som utfører PCR-diagnostikk, forsynes med svært følsomme testsystemer. I laboratoriet "Invitro", for eksempel, brukes tester med følsomhet på 15 IE / ml. Laboratoriearbeidere er forpliktet til å gi informasjon om sensitiviteten til testene til pasienter og leger ved første forespørsel.

Kvantitativ analyse av PCR bestemmer graden av viremia, det vil si konsentrasjonen av patogenet i blodet, viral belastning. Resultatet av denne studien, i motsetning til høyverdig PCR, uttrykkes i antall, for eksempel 2 x 10 * 6 IE / ml, som betyr 2 millioner internasjonale enheter i 1 ml blod. Noen laboratorier bruker en annen indikator - antall kopier / ml. Disse to indikatorene er enkle å konvertere: 1 internasjonal enhet er 4 eksemplarer av RNA. Dermed vil 2 x 10 * 6 IE / ml bety at 8 x 10 * 6 kopier av viralt RNA i 1 ml, dvs. 8 millioner eksemplarer i 1 ml blod.

Genotyping er definisjonen av et av seks genotyper av et virus. Det kliniske bildet, utviklingsgraden av leverkomplikasjoner og prognosen for pasientens fremtidige liv, er avhengig av årsaksmodellens genotype. Genotypen av viruset er svært viktig allerede i diagnosetrinnet, siden kombinasjonen av legemidler og varigheten av terapeutisk kurs som skal tildeles pasienten, avhenger av riktig bestemmelse.

Men selv denne tilsynelatende "perfekte" laboratorieforskningen har sine ulemper:

  • studien replikerer det genetiske materialet til alle patogener, selv ikke-levende, noe som kan forvride resultatet. Derfor, for å overvåke effekten av PCR reanalyse utføres tidligst 2 måneder etter foregående for å drept virus hadde "off" kroppen til pasienten;
  • En del av virusgenomet, som er bestemt ved hjelp av testsystemer, kan teoretisk være tilstede i andre virus eller mikroorganismer, så det er en mulighet for en falsk positiv respons;
  • virus mutere raskt. Noen ganger er hastigheten og omfanget av virusmutasjon så høy at testsystemet slutter å fange sitt genom. Som et resultat er et falskt negativt resultat mulig.

For å utjevne disse manglene foretar produsenter av laboratorietestsystemer for PCR-diagnostikk hele tiden sine tester, inkludert kryssreaksjoner og følsomhet overfor en bestemt genotype av viruset.

Hvordan ta en PCR-test for hepatitt C?

For at konklusjonen av en PCR-undersøkelse skal være pålitelig, er det nødvendig å følge reglene for utarbeidelse for sin oppførsel nøye:

  • Forskning utføres på tom mage (glukose, fett, mineraler, som kommer inn i blodet fra mat, kan påvirke hastigheten og kvaliteten på enzymreaksjonen);
  • gapet mellom det siste måltidet og blodprøvetaking for analyse bør være minst 8 timer;
  • på tvers av studien er det forbudt å ta alkohol og konsumere fettstoffer, hvor elimineringsperioden er langvarig;
  • en dag før du går til laboratoriet, bør unngå sterkt fysisk og følelsesmessig stress;
  • inntil blodprøvetaking ikke anbefales å røyke.

For å unngå utseendet av falske konklusjoner, må den påståtte pasienten komme til laboratoriet litt tidligere enn blodet vil bli tatt. Det tar 15-20 minutter for en person å få pusten, roe seg ned. Adrenalin, som er tilstede i blodet etter en rask tur, kan påvirke resultatet av undersøkelsen.

Hvis pasienten blir referert til analyse, tar det medisiner, bør han varsle legen om dette. Det er mulig at noen av dem må nektes i noen tid (hvis mulig).

Resultatet av analysen av PCR for hepatitt C

Dekoding av resultatene som er involvert i laboratorielegen på laboratoriet som gjennomførte analysen. Dekoding er definisjonen av avviket av resultatet oppnådd fra normen. Indikatorhastigheten er etablert direkte av produsenten av testsystemet, som brukes av laboratoriet for diagnostikk. Det er derfor ikke overraskende at i noen laboratorier er virusbelastningen bestemt i IE / ml, og i andre i eksemplarer / ml.

Etter å ha fått konklusjonen, er det nødvendig å kunne tolke det riktig. Tolkning av resultatene av studien bør forholde seg til behandlende lege av pasienten med hepatitt C først etter en objektiv, instrumental og laboratorieundersøkelse av pasienten, kan legen få nok data til kompetent tolkning av PCR resultater.

Evaluering av kvalitativ analyse, som regel, forårsaker ikke vanskeligheter, selv hos pasienter. Resultatet kan bare være ett: "oppdaget" eller "ikke oppdaget". I dette tilfellet er den andre av normen normen.

Indikatorer for kvantitativ analyse er vanskeligere å tolke. Det viser graden av virusbelastning på pasienten. Selv blant hepatologer er det ingen konsensus om hvordan man skal behandle den oppdagede viremien. De fleste leger er tilbøyelige til å tro at en høy belastning på mer enn 8 × 10 * 5 IE / ml bør vurderes. En belastning på mer enn 1 × 10 * 7 IE / ml regnes som svært høy, mens en lav belastning er mindre enn 4 × 10 * 5 IE / ml.

Graden av viral belastning antyder virulens (aggressivitet) av viruset: Jo større mengden i blodet, jo raskere komplikasjoner av leveren kan utvikles. En høy konsentrasjon av viruset i blodet av en gravid kvinne øker sannsynligheten for dens gjennomtrengning gjennom hemato-placental barrieren mot fosteret. Viremia påvirker også effektiviteten av behandlingen: med lavt antall, er effektiviteten av behandlingen høyere enn hos de høye.

For å være trygg på nøyaktigheten av analysen av PCR for hepatitt C, er det nødvendig å gi fortrinn til de laboratoriene som har fungert bra. Prispolitikken i dette tilfellet bør ikke spille en hovedrolle.


Flere Artikler Om Leveren

Hepatitt

"Fattig lever": årsaker, symptomer, effekter og behandling.

Vanlig inntak av alkohol er skadelig for kroppen - alle vet denne enkle sannheten, selv en person som er langt fra medisin. Det er heller ingen hemmelighet at misbruk av varme drikker kan føre til skrumplever i leveren - brudd på strukturen og funksjonene til dette viktige organet.
Hepatitt

Diett 6 tabell: hva er mulig, hva er umulig (tabell), meny

Diett 6-tabell er et terapeutisk diett, hvis formål er å redusere dannelsen av urinsyre i kroppen ved å begrense animalske proteiner, fett og salt, samt aktiv eliminering av den allerede eksisterende syren fra kroppen.